國產和進口分光光度計怎么選擇
2020-10-12
國產分光光度計在波長準確度和重復性、雜散光，光度準確性和重復性，吸光度范圍，基線穩(wěn)定性等重要指標上與進口光度計相比有較大的差距，進口產品的波長范圍還可以擴展到近紅外（大紫外）。
由于國產品在測量數(shù)據(jù)的準確度和重現(xiàn)性，以及測量范圍、可擴展附件等方面的不足，一些測試工作需要使用進口分光光度計。
一般教學用途及要求的，建議使用國內分光光度計；科學研究等特殊要求的，建議采購進口分光光度計。
分光光度計，又稱光譜儀(spectrometer)，是將成分復雜的光，分解為光譜線的科學儀器。主要用于進行以下定性定量分析：檢定物質、與標準物及標準圖譜對照、比較最大吸收波長吸收系數(shù)的一致性、純度檢驗、推測化合物的分子結構、絡合物組成及穩(wěn)定常數(shù)的測定
分光光度計原理
分光光度計采用一個可以產生多個波長的光源，通過系列分光裝置，從而產生特定波長的光源，光線透過測試的樣品后，部分光線被吸收，計算樣品的吸光值，從而轉化成樣品的濃度。樣品的吸光值與樣品的濃度成正比。
單色光輻射穿過被測物質溶液時，被該物質吸收的量與該物質的濃度和液層的厚度（光路長度）成正比，其關系如下式：
A=-lg(I/I0)=-lgT=kLc
式中 :A 為吸光度；
I0為入射的單色光強度；
I 為透射的單色光強度；
T 為物質的透射率；
k 為摩爾吸收系數(shù)；
L 為被分析物質的光程，即比色皿的邊長；
c 為物質的濃度；
物質對光的選擇性吸收波長，以及相應的吸收系數(shù)是該物質的物理常數(shù)。當已知某純物質在一定條件下的吸收系數(shù)后可用同樣條件將該供試品配成溶液，測定其吸收度,即可由上式計算出供試品中該物質的含量。在可見光區(qū)，除某些物質對光有吸收外，很多物質本身并沒有吸收但可在一定條件下加入顯色試劑或經(jīng)過處理使其顯色后再測定,故又稱比色分析。由于顯色時影響呈色深淺的因素較多，且常使用單色光純度較差的儀器，故測定時應用標準品或對照品同時操作。
分光光度計類型
分光光度計是一種分析測量光譜的儀器，因為需求的不同，分光光度計有著不同的種類，比如可見分光光度計、紫外可見分光光度計、紅外分光光度計、熒光分光光度計和原子吸收分光光度計等等，下面為大家介紹幾種常見的分光光度計種類區(qū)別是什么。
幾種常見的分光光度計種類區(qū)別是什么
(1)可見分光光度計
用來測量待測物質對可見光(400～760nm)的吸光度并進行定量分析的儀器，稱為可見分光光度計?？稍?00nm測定細菌細胞密度。
(2)紫外可見分光光度計
紫外可見光譜儀用來測量待測物質對可見光或紫外光(200～760nm)的吸光度并進行定量分析的儀器。可以測定核酸和蛋白的濃度，也可以測定細菌細胞密度。
紫外分光光度計又可分為單光束,假雙光束,雙光束。它們的用途又有區(qū)別。
單光束：適于在給定波長處測量吸光度或透光度，一般不能作全波段光譜掃描，要求光源和檢測器具有很高的穩(wěn)定性。
雙光束：自動記錄，快速全波段掃描?？上庠床环€(wěn)定、檢測器靈敏度變化等因素的影響，特別適合于結構分析。儀器復雜，價格較高。
假雙光束也就是比例雙光束，它的原理是由同一單色器發(fā)出的光被分成兩束，一束直接到達檢測器，另一束通過樣品后到達另一個檢測器。這種儀器的優(yōu)點是可以監(jiān)測光源變化帶來的誤差，但是并不能消除參比造成的影響。
(3)紅外分光光度計
一般的紅外光譜是指大于760nm的紅外光譜，這是研究有機化合物最常用的光譜區(qū)域，能分析各種狀態(tài)(氣、液、固)的試樣。
紅外光譜法的特點是：快速、樣品量少(幾微克-幾毫克)，特征性強(各種物質有其特定的紅外光譜圖)、能分析各種狀態(tài)(氣、液、固)的試樣以及不破壞樣品。
(4)熒光分光光度計
熒光分光光度計是用于掃描液相熒光標記物所發(fā)出的熒光光譜的一種儀器。應用于科研、化工、醫(yī)藥、生化、環(huán)保以及臨床檢驗、食品檢驗、教學實驗等領域。
通過對這些參數(shù)的測定, 不但可以做一般的定量分析, 而且還可以推斷分子在各種環(huán)境下的構象變化,從而闡明分子結構與功能之間的關系。
(5)原子吸收分光光度計
該法主要適用樣品中微量及痕量組分分析常規(guī)儀器之一。是材料分析及質量控制部門進行常量、微量金屬(半金屬)元素分析的有力工具。
分光光度計儀器組成
分光光度計已經(jīng)成為現(xiàn)代分子生物實驗室常規(guī)儀器。常用于核酸，蛋白定量以及細菌生長濃度的定量。
儀器主要由光源、單色器、樣品室、檢測器、信號處理器和顯示與存儲系統(tǒng)組成。
分光光度計使用方法
1.接通電源，打開儀器開關，掀開樣品室暗箱蓋，預熱10分鐘。
2.將靈敏度開關調至“1”檔（若零點調節(jié)器調不到“0”時，需選用較高檔。）
3.根據(jù)所需波長轉動波長選擇鈕。
4.將空白液及測定液分別倒入比色杯3/4處，用擦鏡紙擦清外壁，放入樣品室內，使空白管對準光路。
5.在暗箱蓋開啟狀態(tài)下調節(jié)零點調節(jié)器，使讀數(shù)盤指針指向t=0處。
6.蓋上暗箱蓋，調節(jié)“100”調節(jié)器，使空白管的t=100，指針穩(wěn)定后逐步拉出樣品滑竿，分別讀出測定管的光密度值，并記錄。
7.比色完畢，關上電源，取出比色皿洗凈，樣品室用軟布或軟紙擦凈。
注意事項
1．該儀器應放在干燥的房間內，使用時放置在堅固平穩(wěn)的工作臺上，室內照明不宜太強。熱天時不能用電扇直接向儀器吹風，防止燈泡燈絲發(fā)亮不穩(wěn)定。
2．使用本儀器前，使用者應該首先了解本儀器的結構和工作原理，以及各個操縱旋鈕之功能。在未按通電源之前，應該對儀器的安全性能進行檢查，電源接線應牢固，通電也要良好，各個調節(jié)旋鈕的起始位置應該正確，然后再按通電源開關。
3．在儀器尚未接通電源時，電表指針必須于“0”刻線上，若不是這種情況，則可以用電表上的校正螺絲進行調節(jié)。
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